國產(chǎn)液相色譜的類型按組分在兩相間分離機(jī)理的不同主要分為液-固吸附色譜法、液-液分配色譜法、化學(xué)鍵合相色譜法、離子交換色譜法和凝膠色譜法等。
1.液-固吸附色譜法
液-固吸附色譜法(LSC)是以固體吸附劑為固定相，吸附劑表面的活性中心有吸附能力，試樣分子被流動相帶入柱內(nèi)時，它將與流動相溶劑分子在吸附劑表面發(fā)生競爭性吸附。
目前經(jīng)常使用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、分子篩(極性)和活性炭(非極性)等，以硅膠較為常用。
液-固吸附色譜法的流動相可以是各種不同極性的一元或多元溶劑。其分離原理是組分在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的吸附與解吸附分配平衡。
液-固吸附色譜法選擇流動相的原則是：極性大的樣品需用極性強(qiáng)的洗脫劑，極性弱的樣品宜用極性較弱的洗脫劑。
液-固吸附色譜法選擇性好，較大允許進(jìn)樣量較大，在分離幾何異構(gòu)體、族分離和制備色譜方面具有*的意義。液-固色譜還可用于分離偶氮染料、維生素、甾族化合物、多核苷芳烴、脂肪、油類、極性較小的植物色素等。
2.液-液分配色譜法
液-液分配色譜法(LLC是根據(jù)物質(zhì)在兩種互不相溶(或部分互溶)的液體中溶解度的不同而實現(xiàn)分離的方法。通過在擔(dān)體(載體)上涂漬一薄層固定液制備固定相，與流動相一起構(gòu)成液-液兩相，根據(jù)各組分在兩相間分配系數(shù)的不同，經(jīng)反復(fù)多次分配平衡而實現(xiàn)分離。
根據(jù)固定相和流動相之間相對極性的大小，可將分配色譜法分為兩類。流動相極性小而固定相極性大的稱為正相分配色譜法，常用于分離強(qiáng)極性化合物；流動相極性大而固定相極性小的稱為反相分配色譜法，適于分離弱極性的化合物。
分配色譜法的固定相由載體和固定液組成。載體的材料可以是惰性的玻璃微球，也可以是吸附劑。常用的固定液只有幾種極性不同的物質(zhì)，如聚乙二醇、聚酰胺、正十八烷和異三十烷等。
分配色譜法中所用流動相的極性必須與固定相顯著不同，以避免固定相溶解于流動相而流失。一般原則是：若用極性較強(qiáng)的或親水性物質(zhì)為固定相，應(yīng)以極性較弱的或親脂性溶劑為流動相；若用非極性或親脂性物質(zhì)為固定相，則應(yīng)以極性較大的或親水性溶劑為流動相。選擇流動相一般根據(jù)實驗來選擇，正相色譜法常用低極性溶劑，如烴類，加入適量極性溶劑如氯仿、醇類，以調(diào)節(jié)洗脫強(qiáng)度。反相色譜法的流動相多以水或無機(jī)鹽緩沖液為主體，加入甲醇、乙腈等調(diào)節(jié)極性。梯度洗脫時，正相色譜法通常逐漸增大洗脫劑中極性溶劑的比例，而反相色譜法則與之相反，逐漸增大甲醇和乙腈的配比。
3.化學(xué)鍵合相色譜法
化學(xué)鍵合即用化學(xué)反應(yīng)的方法通過化學(xué)鍵將固定液結(jié)合在載體表面。采用化學(xué)鍵合相的液相色譜法稱為化學(xué)鍵合相色譜法，簡稱鍵合相色譜。鍵合固定相非常穩(wěn)定，在使用中不易流失，適于梯度洗脫。由于鍵合到載體表面的官能團(tuán)可以是各種極性的，因此它適用于各種樣品的分離測定。用來制備鍵合固定相的載體，幾乎都用硅膠。通常反應(yīng)發(fā)生在硅膠表面的硅醇基(≡Si-OH)上，形成硅氧碳鍵型(≡Si-O-C)、硅氧硅碳型(≡Si-O-Si-C )、硅碳型(≡Si-C)和硅氮型(≡Si-N)四種類型，其中以硅烷化鍵合反應(yīng)(硅氧硅碳型)較為常用，如十八烷基鍵合硅膠柱(簡稱碳十八柱，ODS柱)，它是高效液相色譜法較為理想的固定相。
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